Diferença entre clonagem genética e PCR

Principal diferença

A principal diferença entre a clonagem gênica e a PCR é que a clonagem gênica é uma técnica pela qual o gene ou DNA desejado pode ser produzido in vivo pela formação de rDNA (DNA recombinante), enquanto a PCR é uma técnica na qual o gene ou DNA desejado pode ser produzido in vivo pela formação de rDNA (DNA recombinante), essa amplificação de DNA é realizada in vitro por ciclos de fita repetidos. separação e polimerização.

Clonagem de genes vs. PCR

A formação de múltiplas cópias de DNA a partir de uma única desejada é conhecida como proliferação de DNA ou amplificação de DNA. Os dois métodos a seguir são geralmente usados ​​para amplificar o DNA, ou seja, clonagem de genes e PCR ou reação em cadeia da polimerase. Estes dois são produtos biotecnológicos que desempenham um papel importante na compreensão das doenças. Usando essas técnicas moleculares, um cientista pode fazer mais e mais cópias do DNA desejado. A clonagem de genes é uma técnica pela qual o DNA desejado ou gene de interesse pode ser obtido in vivo (dentro de um organismo) através da formação de rDNA (DNA recombinante, uma molécula de DNA que carrega material genético de múltiplas fontes). Por outro lado, PCR, que significa reação em cadeia da polimerase, é uma técnica na qual o DNA é amplificado in vitro (em um tubo de ensaio em vez de em um organismo vivo) por ciclos repetidos de separação e polimerização de suporte sem usar rDNA. Para a clonagem de genes, é necessária uma grande quantidade de DNA para amplificação, ou seja, pelo menos um micrograma, enquanto apenas um nanograma de DNA é suficiente na PCR para amplificação. Além disso, células bacterianas, DNA ligase, DNA vetorial e enzimas de restrição são necessárias para a clonagem de genes. Por outro lado, na técnica de PCR é necessária uma DNA polimerase termoestável, nucleotídeos de DNA e primers de RNA junto com um segmento de DNA. A clonagem de genes é um processo trabalhoso e tem mais chance de erros, enquanto a PCR não é trabalhosa e tem menos chance de erros. uma grande quantidade de DNA é necessária para amplificação, ou seja, pelo menos um micrograma, enquanto apenas um nanograma de DNA é suficiente em PCR para amplificação. Além disso, células bacterianas, DNA ligase, DNA vetorial e enzimas de restrição são necessárias para a clonagem de genes. Por outro lado, na técnica de PCR é necessária uma polimerase de DNA termoestável, nucleotídeos de DNA e primers de RNA junto com um segmento de DNA. de erros. uma grande quantidade de DNA é necessária para a amplificação, ou seja, pelo menos um micrograma, enquanto apenas um nanograma de DNA é suficiente em PCR para amplificação. Além disso, células bacterianas, DNA ligase, DNA vetorial e enzimas de restrição são necessárias para a clonagem de genes. Por outro lado, na técnica de PCR é necessária uma polimerase de DNA termoestável, nucleotídeos de DNA e primers de RNA junto com um segmento de DNA. de erros. e primers de RNA junto com o segmento de DNA são necessários na técnica de PCR. A clonagem de genes é um processo de trabalho intensivo e tem mais chance de erros, enquanto a PCR não é trabalhoso e tem menos chance de erros. e primers de RNA junto com o segmento de DNA são necessários na técnica de PCR. A clonagem de genes é um processo de trabalho intensivo e tem mais chance de erros, enquanto a PCR não é trabalhoso e tem menos chance de erros.

Quadro comparativo

O que é clonagem genética?

A clonagem de genes é um processo pelo qual podemos obter as múltiplas cópias do nosso gene necessário ou parte do DNA in vivo formando rDNA (DNA recombinante) .No século 19, Hans Driesch foi o primeiro a clonar animais dividindo o embrião de um ouriço-do-mar. Para amplificar o DNA por clonagem de genes, o DNA do organismo contendo todos os genes do organismo é primeiro isolado. O gene necessário é então cortado no tamanho correto usando enzimas de restrição. As mesmas enzimas de restrição são usadas para cortar o plasmídeo ou DNA vetorial (uma molécula transportadora auto-replicante). O gene ou DNA necessário é então misturado com o plasmídeo. O plasmídeo e o DNA necessário são unidos com a ajuda da DNA ligase. Este plasmídeo recombinante é então inserido na bactéria através de um processo conhecido como transformação. Esta bactéria então se reproduz repetidamente e forma várias cópias do DNA necessário junto com a replicação do plasmídeo.

O que é PCR?

PCR significa «reação em cadeia da polimerase». É uma reação cíclica in vitro que também é usada para amplificar o DNA. Kary Mullis inventou pela primeira vez a técnica de PCR em 1983 e recebeu o Prêmio Nobre em 1993. A PCR requer uma DNA polimerase termoestável, por exemplo, a polimerase Taq, porque a temperatura continua mudando durante este processo. Além disso, primers de RNA, projetados de acordo com o segmento necessário do DNA e nucleotídeos de DNA livres, também são necessários. Na presença de todas essas coisas, a reação da polimerase cíclica se repete várias vezes para formar as múltiplas cópias necessárias de DNA in vitro (em tubos de ensaio no laboratório).

Principais diferenças

1. Uma técnica de amplificação de DNA na qual o DNA necessário pode ser obtido in vivo formando rDNA (DNA recombinante) e introduzindo-o em bactérias é conhecida como clonagem de genes, enquanto uma técnica de amplificação de DNA na qual o DNA necessário pode ser obtido in vitro por ciclos repetidos. da separação e polimerização do suporte é conhecido como PCR ou reação em cadeia da polimerase.
2. Em 1800, Hans Driesch foi o primeiro a clonar animais, por outro lado, em 1983, Kary Mullis inventou a técnica de PCR.
3. O DNA recombinante é usado na clonagem de genes. Em contraste, não há necessidade de rDNA em PCR.
4. Para a clonagem de genes, é necessária mais quantidade de DNA para amplificação, ou seja, pelo menos um micrograma do outro lado, apenas um nanograma de DNA é suficiente na PCR para amplificação.
5. Células bacterianas, DNA ligase, DNA vetorial e enzimas de restrição são necessários para a clonagem de genes. Por outro lado, na técnica de PCR, uma polimerase de DNA termoestável, nucleotídeos de DNA e primers de RNA são necessários juntamente com um segmento de DNA.
6. Na clonagem gênica, o DNA amplificado deve ser analisado na etapa final para obter o DNA desejado, enquanto se o DNA estiver puro antes de iniciar uma reação, não é necessária a análise em PCR.
7. A clonagem de genes leva de 2 a 4 dias para um experimento; por outro lado, 4 horas são suficientes para um experimento de PCR.
8. Não há necessidade de automação na clonagem de genes, enquanto a automação é obrigatória na PCR.
9. Por outro lado, a clonagem de genes é um processo trabalhoso; A PCR não é trabalhosa.
10. A clonagem de genes tem maior probabilidade de cometer erros; por outro lado, a PCR tem menos chance de erros.
11. O DNA amplificado por clonagem de genes tem usos limitados, enquanto um DNA amplificado por PCR pode ser usado para vários propósitos devido à menor chance de erros.

Conclusão

A discussão acima resume que tanto a clonagem de genes quanto a PCR são técnicas importantes usadas para amplificar o DNA. A clonagem de genes é um processo in vivo (ocorre dentro de um organismo), que leva tempo e tem maior probabilidade de cometer erros, enquanto a PCR é um processo in vitro (no tubo de ensaio dentro de laboratórios), um processo rápido e com menor chance de erro.