Principal diferença
A principal diferença entre as enzimas de restrição tipo I e tipo II é que as enzimas de restrição tipo I são muito complexas em comparação com as enzimas de restrição tipo II e, além disso, as enzimas de restrição tipo I são compostas por três subunidades não idênticas. Por outro lado, as enzimas de restrição do tipo II são constituídas por duas subunidades idênticas. Os núcleos que cortam o DNA em uma posição interna são conhecidos como enzimas de restrição. O ponto onde essas enzimas de restrição cortam é no meio do DNA, mas não no final. Devido a essa propriedade das enzimas de restrição, elas são conhecidas como endonucleases, também chamadas de tesouras moleculares, facas moleculares, bisturis moleculares ou enzimas de restrição. O sítio de reconhecimento ou sítio de restrição é a região onde essas enzimas de restrição cortam o DNA. Este local de restrição é de pelo menos 4-8 pares de bases.
- Endonuclease de restrição tipo I
- Endonuclease de restrição tipo II
- Endonuclease de restrição tipo III
Enzimas de restrição tipo I
As enzimas do tipo I são multi-subunidades e são uma combinação complexa de enzimas de modificação e restrição. Essas enzimas cortam o DNA em pontos aleatórios, mas longe de suas sequências de reconhecimento. Essas enzimas eram conhecidas por serem muito raras, mas agora, após análise de genomas sequenciados, descobrimos que são comuns. As enzimas de restrição do tipo I não formam fragmentos de restrição discretos ou padrões de bandas de gel, portanto, não são usadas tanto quanto as enzimas do tipo II, mas são de particular importância bioquímica.
Enzimas de restrição tipo II
Enzimas de restrição do tipo II dentro de seu sítio de reconhecimento ou próximo a seus sítios de reconhecimento, em posições definidas. Além disso, eles produzem padrões de bandas de gel discretos e fragmentos discretos. Eles têm muito valor prático e são usados com muita frequência. Eles estão amplamente disponíveis comercialmente. A maioria dessas enzimas se liga ao DNA como homodímeros e também reconhece sequências de DNA que são simétricas. Algumas dessas enzimas de restrição também reconhecem sequências de DNA assimétricas porque se ligam como heterodímeros. Algumas enzimas também reconhecem sequências contínuas. Nestas sequências, dois semi-sítios são adjacentes à sequência de reconhecimento. Algumas dessas enzimas também reconhecem sequências descontínuas, nas quais os semi-sítios são separados uns dos outros. A clivagem que ocorre no DNA deixa 5-fosfato de um lado e 3-hidroxila do outro. Eles são menores com subunidades que estão na faixa de cerca de 200-350. As enzimas do tipo II mais comuns são do tipo IIS. Eles abrem para o lado longe de seu local de reconhecimento. São de tamanho normal e reconhecem sequências assimétricas e contínuas. Eles têm dois domínios, um para DNA e outro para clivagem de DNA. Na maioria das partes, eles se ligam ao DNA como monômeros. As fitas de DNA contendo vários sítios de reconhecimento, as enzimas de reconhecimento do tipo II são muito ativas nelas. Outro tipo de enzimas do tipo II são o tipo IIG. Possuem enzimas de restrição e modificação, além disso, são grandes. Eles se separam do lado de fora de seu local de reconhecimento. São de tamanho normal e reconhecem sequências assimétricas e contínuas. Eles têm dois domínios, um para DNA e outro para clivagem de DNA. Na maioria das partes, eles se ligam ao DNA como monômeros. As fitas de DNA contendo vários sítios de reconhecimento, as enzimas de reconhecimento do tipo II são muito ativas nelas. Outro tipo de enzimas do tipo II são o tipo IIG. Possuem enzimas de restrição e modificação, além disso, são grandes. Eles abrem para o lado longe de seu local de reconhecimento. São de tamanho normal e reconhecem sequências assimétricas e contínuas. Eles têm dois domínios, um para DNA e outro para clivagem de DNA. Na maioria das partes, eles se ligam ao DNA como monômeros. As fitas de DNA contendo vários sítios de reconhecimento, as enzimas de reconhecimento do tipo II são muito ativas nelas. Outro tipo de enzimas do tipo II são o tipo IIG. Possuem enzimas de restrição e modificação, além disso, são grandes. Outro tipo de enzimas do tipo II são o tipo IIG. Possuem enzimas de restrição e modificação, além disso, são grandes. Outro tipo de enzimas do tipo II são o tipo IIG. Possuem enzimas de restrição e modificação, além disso, são grandes.
Principais diferenças
- As enzimas de restrição do tipo I são mais complexas em comparação com as enzimas de restrição do tipo II.
- As enzimas de reconhecimento do tipo I são compostas por três subunidades não idênticas. As enzimas de reconhecimento do tipo II são compostas por duas subunidades idênticas.
- O peso molecular das enzimas de restrição do tipo I é de 400.000 daltons. O peso molecular das enzimas de restrição do tipo II é de 20.000 a 100.000 daltons.
- O sítio de clivagem da enzima de restrição tipo I está a 1000 nucleotídeos do sítio de reconhecimento. O sítio de clivagem da enzima de restrição tipo II está no mesmo sítio de reconhecimento.
- A sequência de clivagem não é específica para enzimas de restrição tipo I. A sequência de clivagem é específica para enzimas de restrição tipo II.
- As enzimas do tipo I são responsáveis por proteger o DNA por metilação e as enzimas do tipo II não têm atividade de metilação.
- Para a ativação das enzimas do tipo I, são necessários ATP, Mg2+ e adenosilmetionina. Para a ativação de enzimas do tipo II, apenas Mg2+ é necessário.
- A enzima do tipo I tem atividade de endonuclease e metilase. O tipo II tem apenas atividade de restrição, sem atividade de endonuclease ou metilase.
- As enzimas do tipo I foram identificadas antes das enzimas do tipo II.
- O tipo I foi identificado em duas cepas diferentes de E. coli.
- Exemplos de enzimas do tipo I são Ecok e EcoB. Exemplos de enzimas do tipo II são Hind II e EcoRI.